Цель исследований: изучение паразитофауны желудочно-кишечного тракта домашних коз на территории Московского региона с апробацией стандартной схемы терапии выявленных видов возбудителей нематодозов.

Материалы и методы. Исследовано 56 взрослых домашних коз на территории Московской области в летне-осенний период. Содержание животных – пастбищно-стойловое. Исследовано 98 проб фекалий на наличие желудочно- кишечных паразитов флотационным методом с использованием раствора аммиачной селитры, формалин-эфирным осаждением, методом Бермана (Zajac, Conboy, 2012). 11 козам с обнаруженными яйцами сем. Strongylidae в пробах фекалий, 4 – с Nematodirus spp., 6 – с сочетанной инвазией сем. Strongylidae и Trichuris spp. задавали фенбендазол в дозе 10 мг/кг 5 сут подряд. При низкой эффективности повторяли дачу фенбендазола в дозе 20 мг/кг 5 сут. Фекалии исследовали через 10, 30 и 90 сут после дегельминтизации.

Результаты и обсуждение. У домашних коз на территории Московской области зарегистрированы нематоды сем. Strongylidae с экстенсивностью инвазии (ЭИ) 44,6%, нематоды Trichuris spp., ЭИ 10,7%, Nematodirus spp., ЭИ 3,6%, кокцидиозы Eimeria spp., ЭИ 26,8% и Giardia spp., ЭИ 3,6%. Яйца трематод и цестод обнаружены не были. Терапия фенбендазолом в дозе 10 мг/кг в течение 5 сут показала 100%-ную эффективность при стронгилятозах и нематодирозе желудочно-кишечного тракта коз. Эта доза была неэффективна при паразитировании Trichuris spp. При повышении дозы фенбендазола до 20 мг/кг в течение 5 сут установлена 100%-ная эффективность. Все козы оставались свободными от нематод на 30-е и 90-е сутки после проведенной терапии по результатам копрологических исследований. При вскрытии одной козы кишечные паразиты после лечения обнаружены не были. Фенбендазол остается эффективным препаратом при лечении нематодозов желудочно-кишечного тракта коз.

Цель исследований: изучение особенностей распространения эзофагостомоза в регионе Северного Кавказа с учетом породы и возраста овец.

Материалы и методы. Материалом для исследований служили комплекты отделов кишечника (по 90 комплектов) и пробы фекалий (по 300 образцов) овец северокавказской мясошерстной и карачаевской грубошерстной пород. В работе использован метод полного гельминтологического вскрытия по К. И. Скрябину, а также методы копроларвоовоскопии. Определение видовой принадлежности нематод проводили по определителям К. И. Скрябина и др.

Результаты и обсуждение. Эзофагостомоз в Кабардино-Балкарии является энзоотической инвазией с охватом 44,44–61,11% поголовья овец. Интенсивность заражения эзофагостомами колеблется от 110,3±12,8 до 303,53±28,20 экз./гол. У ягнят до 1 года экстенсивность инвазии эзофагостомами составила 63,33% при интенсивности инвазии 328,6±28,3 экз./гол.; у ягнят карачаевской породы соответственно 43,33% и 212,4±19,2 экз./гол.; у молодняка овец 1–2-х лет 80,0% и 406,3±39,9 экз./гол.; у карачаевской породы – 63,33% и 289,6±25,7 экз./гол. При эзофагостомозе независимо от возраста наиболее восприимчивыми являются овцы северокавказской мясошерстной породы, что связано с особенностями ареала и экологией питания. Эзофагостомоз, независимо от породы, наиболее распространен у ягнят от 3-х месяцев до 1 года. Эти данные следует использовать при прогнозировании эпизоотической ситуации и поиске мер по борьбе с эзофагостомозом овец в регионе.

Цель исследований: изучить биологию Metagonimus yokogawai, сезонную динамику метагонимоза в Верхнем Приамурье и влияние температурных факторов на экстенсивность заражения.

Материалы и методы. Материал для исследования собирали в водоемах Амурской области. Исследования моллюсков на зараженность личинками M. yokogawai проводили по методике А. С. Шатрова: под микроскопом МБС-9 исследовали воду из чашек Петри на наличие личинок трематод после суточной экспозиции в ней моллюсков при температуре воды 18 оС. Также исследовали печень моллюсков Semisulcospiro cancellata на наличие личинок трематод с помощью компрессория для трихинеллоскопии. Исследование 37 видов рыб на зараженность метацеркариями M. yokogawai проводили по методике Г. А. Глазкова. Определяли зараженность рыб метацеркариями M. yokogawai, и экстенсивность инвазии метацеркариями по пораженной чешуе с использованием микроскопа.

Результаты и обсуждение. Зараженность метацеркариями M. yokogawai на обследованных территориях Амурской области различных видов рыб неодинакова и различается в диапазоне от 4 до 57%. Наиболее высокая инвазия дефинитивных хозяев в осеннее время приводит к увеличению концентрации яиц паразита в водоемах в этот период и к массовому заражению моллюсков – промежуточных хозяев. Длительность развития метагонимусов в промежуточных хозяевах обусловлена низкой температурой воды в реках Верхнего Приамурья в осенне-зимне-весенний период. В условиях Верхнего Приамурья пик инвазированности плотоядных метагонимусами наблюдается один раз в году – в осеннее время. Наибольшую опасность для человека представляет рыба, выловленная в осеннее время в равнинных реках.

Цель исследований: дать прогноз эпизоотической ситуации по основным гельминтозам сельскохозяйственных животных в Российской Федерации на 2019 год.

Ежегодные профилактические дегельминтизации в какой-то мере снижают инвазию, но полного оздоровления поголовья от гельминтов не достигается. Одним из средств комплексного влияния на эффективность борьбы с гельминтозами является составление ежегодных прогнозов с учетом влияния факторов внешней среды. Мониторинг и прогнозирование на конкретной местности даёт возможность оценить риски инвазирования конкретного поголовья с учетом численности восприимчивых животных. Прогноз на территории всей Российской Федерации носит обобщающий характер, так как биология гельминтов разных видов имеет существенные различия в зависимости от ареала распространения. На разной территории Российской Федерации прогнозы имеют свои особенности в связи с разными климатическими условиями, численностью и видовым составом промежуточных хозяев (для биогельминтов) и условий содержания животных в конкретной зоне.

Цель исследований: изучить распространение описторхоза у непромысловых рыб в реках и озерах Тверской, Московской, Калужской и Ярославской областей. Отработать комплексный подход при диагностике описторхоза, применяя морфологические, молекулярно-генетические методы и метод биологической пробы.

Материалы и методы. Работу выполняли в 2014–2018 гг. Всего было исследовано 90 экз. непромысловой рыбы, добытой любительским методом вылова, в трех реках и трех озерах центральной России. Метацеркарий выделяли при помощи переваривания мышц рыбы в искусственном желудочном соке в лаборатории санитарной паразитологии ВНИИП. Для дифференциальной диагностики метацеркарий трематод в работе применяли комплексный подход, используя методы морфологического определения при помощи светового микроскопа и специальной литературы, биологической пробы в условиях вивария на золотистых хомяках и при помощи полимеразной цепной реакции (ПЦР) в лаборатории молекулярной биологии ВНИИП, для чего использовали ранее опубликованные видоспецифичные праймеры и стандартные коммерческие наборы для выделения и амплификации ДНК; детекцию реакции проводили в 1,5%-ном агарозном геле.

Результаты и обсуждение. По результатам проведенных исследований, плотва из реки Десна (Московская об- ласть), реки Нара (Калужская область), плотва и густера из реки Волга (Тверская область) заражены метацеркари- ями Opisthorchis felineus, что было подтверждено ПЦР. Плотва, густера и линь из Истринского водохранилища, озера Белого и озера Неро были свободны от метацеркарий O. felineus. Биологическая проба на сирийских хомяках была положительной при скармливании метацеркарий из мышц плотвы, выловленной в реке Десна Московской области. В остальных случаях биологические пробы были отрицательными, несмотря на положительную ПЦР в плотве из реки Нара и плотве и густере из реки Волга. Таким образом, в настоящее время в Центральной России имеются очаги описторхоза O. felineus на малых реках (Десна, Нара) и на реке Волге в районе Тверской области. Интенсивность инвазии у плотвы в малых реках с возрастом уменьшается и протекает в виде моноинвазии, тогда как в реке Волге плотва и густера заражены метацеркариями нескольких видов трематод, а наличие метацеркарий O. felineus в данных видах можно подтверждать при помощи ПЦР, так как биологическая проба при низких концентрациях метацеркарий описторхид мало информативна. В озере Белом на востоке Москвы плотва и линь были свободны от всех метацеркарий трематод, тогда как в Истринском водохранилище Московской области у плотвы и густеры выявляли незначительное число непатогенных для человека и плотоядных метацеркарий трематод. В озере Неро Ярославской области встречались единичные метацеркарии непатогенных трематод.

Цель исследований: изучение иммунотоксических свойств супрамолекулярного комплекса фенбендазола (СМФ).

Материалы и методы. Изучение иммунотоксических свойств СМФ проводили с применением реакции агглютинации и гиперчувствительности замедленного типа. В каждой опытной группе было по 7–8 мышей линии СВА×С57BL/6 массой 16–18 г. СМФ вводили однократно внутрижелудочно в терапевтической дозе 20 мг/кг по действующему веществу, в десятикратной дозе – 200 мг/кг, базовый препарат – фенбендазол задавали в десятикратно увеличенной дозе – 20 мг/кг. Контрольные группы животных получали крахмальный клейстер. Затем мышей иммунизировали интраперитонеально 3%-ной взвесью эритроцитов барана (тест-антиген) и распределили на 8 групп. Влияние препаратов на антителообразование определяли в реакции гемагглютинации, титр антител в сыворотке крови – в микроварианте прямой реакции гемагглютинации с вычислением индекса реакции. Влияние препарата на клеточный иммунитет устанавливали в реакции гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ) к ЭБ.

Результаты и обсуждение. Введение испытуемых препаратов не оказало угнетающего влияния на антителогенез у мышей опытных групп: 6,5±0,22; 6,17±0,47 и 7,75±0,25 (log2) по сравнению с контролем – 7,67±0,21 (log2). Индексы реакции составили соответственно 0,85; 0,80 и 1,01. Пероральное однократное введение СМФ в терапевтической (20 мг/кг) и в десятикратной терапевтической дозе (200 мг/кг) не оказывало влияния на клеточное звено иммунитета. Сдвиги индекса реакции воспаления у животных составили соответственно 9,05±3,47 и 10,05±2,25%. Введение базового препарата стимулировало реакцию ГЗТ, что проявилось увеличением индекса воспаления (21,06±3,32%) по сравнению с контрольной группой (9,27±3,91%).

Цель исследований: изучить переносимость комплексного лекарственного препарата для ветеринарного приме- нения «Инспектор Квадро Табс» на животных в увеличенных дозах.

Материалы и методы. Исследования проводили в ветеринарных клиниках г. Москвы (ООО "LEBEN" и ООО «Вет Кэт») и на базе ФГБНУ «ВНИИП им. К. И. Скрябина». Для изучения влияния препарата на организм животных было сформировано 3 группы по 5 клинически здоровых беспородных животных: кошки 1–2-летнего возраста массой 3–6 кг, котята 7–12-недельного возраста массой 600–1100 г, собаки 1–3-летнего возраста массой 8–11 кг, щенки 7–11-недельного возраста массой 1–6 кг. Препарат применяли в 2 и 5 раз увеличенных дозах трехкратно с интервалом 7 сут. В пери- од опыта за животными вели ежедневное наблюдение, отмечая их общее состояние, поведение, аппетит, контролировали их массу, температуру тела.

Результаты и обсуждение. Установлено, что «Инспектор Квадро Табс» в 2 и 5 раз увеличенных дозах обладает хорошей переносимостью животными, не оказывает отрицательного влияния на общее состояние и поведение кошек, котят, собак и щенков. В процессе опыта не было отмечено отклонений гематологических, биохимических и уро- логических показателей.

Цель исследований: дать характеристику методам испытаний и оценки эффективности антигельминтных препаратов при трихинеллезе и гименолепидозе на лабораторной модели.

Материалы и методы. Проведен анализ литературы и результатов собственных исследований по испытанию и оценке эффективности антигельминтных препаратов при трихинеллезе и гименолепидозе на лабораторной мо- дели, в качестве которой использовали белых мышей массой тела 14–16 г, экспериментально зараженных личинками Trichinella spiralis в дозе 200 личинок на особь и яйцами Hymenolepis nana в дозе 200 инвазионных яиц на особь. Эффективность препаратов учитывали по результатам вскрытия тонкого кишечника животных на 2 и 4-е сутки после введения препаратов соответственно при трихинеллезе и гименолепидозе белых мышей.

Результаты и обсуждение. Подробно описаны рациональные методы испытания препаратов и новых химических соединений на нематодоцидную активность на белых мышах, экспериментально зараженных T. spiralis, и на цестдоцидную активность на белых мышах, экспериментально зараженных H. nana в дозе соответственно 200 личинок и 100–200 яиц на особь. Для изучения эффективности испытуемые препараты вводили животным на 3-и сутки при трихинеллезе и 13-е сутки при гименолепидозе. Учет антигельминтной эффективности препаратов проводили на основании гельминтологического вскрытия тонкого кишечника животных на 2 и 4-е сутки после дачи препаратов соответственно против T. spiralis и H. nana. Обнаруженных гельминтов у животных подопытных и контрольной (нелеченой) групп подсчитывали по типу «контрольный тест», т. е. в сравнении с животными контрольной группы.

Цель исследований: изучить морфофункциональные изменения в тегументе, кишечнике и паренхиме Fasciola hepatica после воздействия триклабендазола.

Материалы и методы. Объектом исследования служили трематоды F. hepatica, взятые через 24 ч из печени спонтанно инвазированных овец после введения триклабендазола в дозе 10 мг/кг. Трематод фиксировали в растворе метилового спирта и ледяной уксусной кислоты в соотношении 3 : 1, а затем в 70%-ном спирте. Материал обрабатывали по общепринятой гистологической методике и заливали в парафин. Срезы толщиной 5–7 мкм окрашивали гистологическими и гистохимическими методами и изучали в световом микроскопе.

Результаты и обсуждение. Морфофункциональные исследования тегумента и кишечника F. hepatica – органов, которые первыми воспринимают антигельминтик, показали их глубокие структурные изменения после действия триклабендазола. Действию антигельминтика подвергается и паренхима – ткань внутренней среды, которая служит системой, регулирующей обменные процессы и гомеостаз организма паразита. Продукты распада паренхимы повышают токсические свойства антигельминтика и его метаболитов, и в совокупности это оказывает более выраженное воздействие на репродуктивные органы, в том числе и на матку с яйцами.

Опасность развития у животных осложнений вследствие лекарственной терапии повышает ответственность разработчиков/производителей за безопасность лекарственных препаратов для ветеринарного применения, в том числе находящихся в гражданском обороте. На момент принятия решения о государственной регистрации лекарственного препарата информация, полученная в процессе его доклинических и клинических исследований о нежелательных реакциях и побочном действии, не может быть полной, так как эти исследования ограничены небольшим количеством и аналогичностью подопытных животных и относительно короткой продолжительностью экспериментов. Кроме этого, при длительном применении препарата возможны отсроченные неблагоприятные побочные реакции, которые могут возникать через месяцы и годы после воздействия лекарственного средства на живой организм. Учитывая это, в организации-производителе (или организации-разработчике) лекарственного препарата должна эффективно функционировать система фармаконадзора, основной задачей которой является мониторинговые исследования безопасности лекарственных средств в предрегистрационный период, отслеживание и анализ данных о действии лекарственного препарата, когда он находится в гражданском обороте, и принятие адекватных мер для предупреждения неблагоприятных последствий лекарственной терапии. В результате проведенного анализа систематизированы данные нормативно-правовых и методических документов по вопросам организации мониторинга безопасности фармакологических лекарственных средств, подготовлены рекомендации, актуализированные с положениями международных и отечественных законодательных нормативных и информационно-справочных документов, относящихся к методологии организации фармаконадзора и мониторингу безопасности лекарственных средств.

Цель исследования: определить эффективность и провести титрацию терапевтической дозы супрамолекулярного комплекса албендазола экстра и триклабендазола при фасциолёзе и нематодозах пищеварительного тракта овец.

Материалы и методы. Испытание эффективности супрамолекулярного комплекса албендазола экстра и триклабендазола на основе низкомолекулярного полимера поливинилпирралидона-17 проводили в Северокавказском Федеральном округе Чеченской Республики с 15 по 30 декабря 2018 г. на 65 овцах тушинской породы, спонтанно инвазированных нематодами пищеварительного тракта и фасциолами. В опыт отбирали зараженных овец по результатам копроовоскопических исследований методом Фюллеборна с использованием раствора аммиачной селитры. Отобранных в опыт овец распределили по принципу аналогов на 5 групп. 15 овцам первой подопытной группы препарат вводили перорально в форме водного раствора с помощью бутылки в дозе 2,0 мг/кг по ДВ (по препарату 20 мг/кг), второй группы – 4,0 мг/кг (40 мг/кг), третьей группы – 5 мг/кг (50 мг/кг по препарату). Четвёртой группе овец для контроля вводили смесь триклабендазола и албендазола (в соотношении 1 : 1) в дозе 4 мг/кг. Пятая группа из пяти овец служила чистым контролем и препарат не получала. После дачи препаратов в течение трех суток наблюдали за клиническим состоянием подопытных овец. Для определения эффективности против фасциол через 8–10 сут после дачи препаратов были убиты по 5 овец с каждой группы с гельминтологическим вскрытием печени. Также отобраны пробы фекалий индивидуально от каждого животного и исследованы методом Фюллеборна. Учёт эффективности препаратов проводили методом «критический тест» и гельминтологическим вскрытием печени после убоя согласно Руководству, одобренному Всемирной Ассоциацией за прогресс ветеринарной паразитологии (1995 г).

Результаты и обсуждение. Супрамолекулярный комплекс на основе албендазола и триклабендазола в дозе 4,0 мг/кг по ДВ (40 мг/кг по препарату) однократно показал 100%-ную эффективность по данным копроовоскопии и убоя против смешанной инвазии, вызванной фасциолами и нематодами пищеварительного тракта овец. Эта доза была наименьшей, при которой получена высокая эффективность и она принята нами, как терапевтическая. Смесь субстанций албендазола и триклабендазола в той же дозе показала слабую эффективность – соответственно 22,0 и 24,5%. Таким образом, получена высокая эффективность супрамолекулярного комплекса на основе албендазола и триклабендазола против фасциол и нематод пищеварительного тракта в 5 раз сниженной терапевтической дозе. Преимуществом препарата является и то, что содержащий в нём албендазол не обладает эмбриотропным действием.

Цель исследований: – получение иммунореагентов для определения двух видов паразитических нематод – Ditylenchus destructor и D. dipsaci (препаратов антигенов и антисывороток к ним).

Материалы и методы. Было проведено три иммунизации лабораторных животных (белые беспородные мыши) в дозе 20 мкг целевого белка на особь с интервалом 7–10 сут. Характеристика эффективного титра полученных антисывороток была выполнена методом дот-ИФА с использованием вторичных антител козы к иммуноглобулинам мыши, коньюгированных с щелочной фосфатазой. Для количественного определения специфичности полученных иммунореагентов использовали планшетный ИФА в непрямом формате.

Результаты и обсуждение. Полученные антисыворотки имеют специфичность по отношению к двум видам нематод D. destructor и D. dipsaci, а также к одному представителю непаразитических нематод Rhabditis sp. Специфичность получаемых антисывороток находится в пределах 82–97 %. Чувствительность антисывороток к гомогенатам стеблевых нематод растений D. destructor и D. dipsaci при титре антисывороток 1 : 3000 составляет 1 нг и 50 нг соответственно.