Морфологическая и молекулярная идентификация Neomoliniella longicorpa gen. et sp. nov. (Digenea: Echinostomatidae) из обыкновенной лысухи Fulica atra (Aves: Rallidae): таксономическая оценка

Цель исследований – морфологическая и молекулярная идентификация трематод, обнаруженных в кишечнике мигрирующих водоплавающих птиц, с последующей таксономической оценкой.
Материалы и методы. Материалом служили половозрелые трематоды, изъятые из кишечника отстрелянных в ходе эколого-фаунистического мониторинга на юге Приморья водоплавающих птиц (Fulica atra и Aythya ferina). Предварительный морфологический анализ показал принадлежность трематод к семейству Echinostomatidae. Препараты гельминтов из F. atra готовили c использованием стандартной методики окрашивания в квасцовом кармине. Нуклеотидные последовательности доменов гена 28S рибосомной РНК были расшифрованы и использованы для установления систематического положения и филогенетических отношений обнаруженных эхиностом путем реконструкции байесовского дерева и дерева максимального правдоподобия.
Результаты и обсуждение. В кишечнике лысухи найдены трематоды, которых следует рассматривать в составе нового рода Neomoliniella как Neomoliniella longicorpa gen. et sp. nov., что подтверждается данными морфологии и генетики. Существование другого криптического вида эхиностоматид сестринского Neomoliniella gen. nov., и вероятно представляющего собой отдельный неизвестный род, продемонстрировано только на филогенетических реконструкциях и подтверждается значениями генетических дистанций. В настоящее время этот таксон обозначен как Echinostomatidae gen. sp. и для обоснования его валидности требуется больше доказательств. Нами впервые обнаружена Echinostoma paraulum в A. ferina на юге Дальнего Востока России. Особенности биологии и морфологии каждой стадии жизненного цикла описанных видов гельминтов должны быть исследованы для оценки не только их научной, но и медицинской значимости. Впервые в истории изучения группы были составлены: определительная таблица для восьми семейств надсемейства Echinostomatoidea и на сегодняшний день самая большая из всех ранее составленных для семейства Echinostomatidae таблица для определения 27 палеарктических родов.

1. Башкирова Е. Я. Эхиностоматиды птиц СССР и обзор циклов их развития // Труды Башкирской научно-исследовательской ветеринарной станции. 1941. Т. 3. С. 243–300.

2. Беспрозванных В. В., Ермоленко А. В., Надточий Е. В. Паразиты животных и человека Юга Дальнего Востока. Часть 2. Трематоды. Владивосток: Дальнаука, 2012. 239 с.

3. Скрябин К. И. Трематоды Уральских птиц // Ежегодник Зоологического Музея АН. 1915. Т. 20. С. 395–416.

4. Скрябин К. И., Башкирова Е. Я. Семейство Echinostomatidae Dietz, 1909. В кн. Трематоды животных и человека. Основы трематодологии. Скрябин К. И. (ред.). М.: Издательство Академии Наук СССР, 1956; 12. С. 51–915.

5. Cribb T. H. C., Bray R. A., Olson P. D., Littlewood D. T. J. Life cycle evolution in the Digenea: a new perspective from phylogeny. Advances in Parasitology. 2003; 54: 197–254. https://doi.org/10.1016/s0065-308x(03)54004-0

6. Darriba D., Taboada G. L., Doallo R., Posada D. jModelTest 2: More models, new heuristics and parallel computing. Nature Methods. 2012; 9: 772.

7. Georgieva S., Faltýnková A., Brown R., Blasco-Costa I., Soldánová M., Sitko J., Scholz T., Kostadinova A. Affiliations expand Echinostoma 'revolutum' (Digenea: Echinostomatidae) species complex revisited: species delimitation based on novel molecular and morphological data gathered in Europe. Parasites Vectors. 2014; 7: 520. https://doi.org/10.1186/s13071-014-0520-8

8. Guindon S., Dufayard J. F., Lefort V., Anisimova M., Hordijk W., Gascuel O. New Algorithms and Methods to Estimate Maximum-Likelihood Phylogenies: Assessing the Performance of PhyML 3.0. Systematic Biology. 2010; 59 (3): 307–321.

9. Hubner F. Uber Echinostomum anceps (Molin, 1859) Dietz, 1909. Zool. Anzeiger. 1939; 128: 176–187.

10. Huelsenbeck J. P., Ronquist F., Nielsen R., Bollback J. P. Bayesian inference of phylogeny and its impact on evolutionary biology. Science. 2001; 294: 2310–2314.

11. Izrailskaia A. V., Besprozvannykh V. V., Tatonova Y. V. Echinostoma chankensis nom. nov., other Echinostoma spp. and Isthmiophora hortensis in East Asia: morphology, molecular data and phylogeny within Echinostomatidae. Parasitology. 2021; 148 (11): 1366–1382. https://doi.org/10.1017/S0031182021000950.

12. Kanev I., Fried B., Radev V. Identification problems with species in the Echinoparyphium recurvatum complex from physid snails in the USA. Parasitology Research. 2008; 103: 963–965. https://doi.org/10.1007/s00436-008-1035-z

13. Kostadinova A., Herniou E. A., Barrett J., Littlewood D. T. Phylogenetic relationships of Echinostoma Rudolphi, 1809 (Digenea: Echinostomatidae) and related genera re-accessed via DNA and morphological analyses. Systematic Parasitology. 2003; 54: 159–176. https://doi.org/10.1023/A:1022681123340

14. Kostadinova A. Family Echinostomatidae. In: Jones A., Bray R. A., Gibson D. I. (Eds.), Keys to the Trematoda, vol. 2. CABI Publishing and The Natural History Museum, Wallingford and London, UK. 2005; 9–64.

15. Kostadinova A., Jones A. Superfamily Echinostomatoidea. In: Jones A., Bray R. A., Gibson D. I. (Eds.), Keys to the Trematoda, vol. 2. CABI Publishing and The Natural History Museum, Wallingford and London, UK. 2005; 5–8.

16. Kumar S., Stecher G., Tamura K. MEGA7: Molecular Evolutionary Genetics Analysis version 7.0 for bigger datasets. Molecular Biology and Evolution. 2016; 33: 1870–1874. https://doi.org/10.1093/molbev/msw054

17. Macko J. K., Spakulová M. Description of rare echinostomatid fluke Echinodollfusia longiuscula n. sp. (Trematoda: Echinostomatidae) parasitizing white stork with an amended diagnosis of the genus Echinodollfusia. Parasitology Research. 2014; 113 (4): 1581–1584. https://doi.org/10.1007/s00436-014-3803-2

18. Morgan J. A. T., Blair D. Nuclear rDNA ITS sequence variation in the trematode genus Echinostoma: An aid to establishing relationships within the 37-collar-spine group. Parasitology. 1995; 111: 609–615. https://doi.org/10.1017/s003118200007709x

19. Morgan J. A. T., Blair D. Relative merits of nuclear ribosomal internal transcribed spacers and mitochondrial CO1 and ND1 genes for distinguishing among Echinostoma species (Trematoda). Parasitology. 1998; 116: 289–297. https://doi.org/10.1017/s0031182097002217

20. Odhner Th. Nordafrikanische Trematoden grosstenteils vom Weissen Nil. Results of the Swedish zoological expedition to Egypt and the White Nile, 1901, under the direction of L. A. Jägerskiöld. Uppsala: Library of the Royal University of Uppsala, 1911; 170.

21. Pantoja C., Faltýnková A., O’Dwyer K., Jouet D., Skírnisson K., Kudlai O. Diversity of echinostomes (Digenea: Echinostomatidae) in their snail hosts at high latitudes. Parasite. 2021; 28: 59. https://doi.org/10.1051/parasite/2021054

22. Sorensen R. E., Curtis J., Minchella D. J. Intraspecific variation in the rDNA its loci of 37-collar-spined echinostomes from North America: implications for sequence-based diagnoses and phylogenetics. Journal of Parasitology. 1998; 84: 992–997.

23. Stanevičiūtė G., Stunžėnas V., Petkevičiūtė R. Phylogenetic relationships of some species of the family Echinostomatidae Odner, 1910 (Trematoda), inferred from nuclear rDNA sequences and karyological analysis. Comparative Cytogenetics. 2015; 9 (2): 257–270. https://doi.org/10.3897/CompCytogen.v9i2.4846

24. Tkach V. V., Littlewood D. T. J., Olson P. D., Kinsella J. M., S´widerski Z. Molecular phylogenetic analysis of the Microphalloidea Ward, 1901 (Trematoda: Digenea). Systematic Parasitology. 2003; 56: 1–15. https://doi.org/10.1023/a:1025546001611

25. Tkach V. V., Kudlai O., Kostadinova A. Molecular phylogeny and systematics of the Echinostomatoidea Looss,1899 (Platyhelminthes: Digenea). International Journal for Parasitology. 2016; 46: 171–185. https://doi.org/10.1016/j.ijpara.2015.11.001

26. Truett G. E., Heeger P., Mynatt R. L., Truett A. A., Walker J. A., Warman M. L. Preparation of PCR-quality mouse genomic DNA with hot sodiumhydroxide and tris (HotSHOT). BioTechniques. 2000; 29: 52–54. https://doi.org/10.2144/00291bm09