Доклиническое тестирование нового отечественного супрамолекулярного комплекса триклабендазола «триклафасцид» на эмбриотропную активность

Цель исследования: эмбриотоксическое и тератогенное действие нового отечественного супрамолекулярного комплекса триклабендазола «триклафасцид». Материалы и методы. Эмбриотоксическое и тератогенное действие новой отечественной лекарственной формы триклафасцида изучали соответствии с «Руководством по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ». Изучение эмбриотропного действия супрамолекулярного комплексного препарата на основе субстанции триклабендазола проводили на 40 белых беспородных крысах - самках массой 220-260г и 10 самцах, в соответствии с Методическими рекомендациями по оценке влияния препарата на генеративную функцию животных. К крысам-самкам подсаживали на ночь самцов из соотношения 1:4. Обнаружение спермиев во влагалищном мазке самки, на утро, после подсадки самца указывало на оплодотворение -первый день беременности. Так как чувствительность эмбриона к химическому веществу различна и зависит от стадий развития плода, животных разделили на 4 группы, по 10 особей в каждой. Триклафасцид вводили беременным самкам перорально в трехкратно увеличенной терапевтической дозе 6,0 мг/кг (60 мг/кг по препарату), первой группе с 1 по 6 день беременности, второй с 7 - 14, третьей с 15 - 19, четвертая группа служила контролем и получала 1% крахмальный гель. На 20-й день беременности крыс усыпляли углекислым газом. После убоя и вскрытия брюшной полости извлекали матку с плодами. Подсчитывали количество желтых тел беременности, мест имплантации, резорбции, живых и мертвых эмбрионов. Для оценки эмбриотоксического эффекта плоды просматривали под бинокулярной лупой для обнаружения внешних аномалий развития, взвешивали, измеряли кранио-каудальный размер, массу и диаметр плаценты. Определяли пред- и постимплантационную гибель и общую эмбриональную смертность эмбрионов. После осмотра эмбрионы от каждой крысы делили на две равные группы: первую фиксировали в растворе Буэна на 14 суток для изучения внутренних органов плодов и аномалий в развитии плодов, которые являются показателями тератогенного эффекта определяемые по методу J.G. Wilson (1965) в модификации отдела эмбриологии НИИЭМ АМН СССР (схема разрезов, сделанных через плод); вторую-фиксировали в 96° спирте для изучения костной системы после ее окрашивания по методу Даусона (A.B. Dawson, 1926). Полученные параметры обрабатывали методом вариационной статистики с помощью простого сравнения средних по двустороннему t-критерию Стьюдента. Различие определяли при 0,05 уровне значимости. Расчет выполнен с помощью программы «Student-200». Результаты и обсуждение. Как показали результаты исследований, триклафасцид не проявил эмбриотоксической активности при воздействии в 3-кратно увеличенной терапевтической дозе 6,0 мг/кг по ДВ. Так, уровень общей, пред-и постимплантационной смертности плодов в подопытных и контрольной группах достоверно не отличались, как при введении препарата на 1-6 дни беременности, так и на 7 - 14 и 15 - 19 дни. На основании полученных данных можно сделать вывод о том, что препарат Триклафасцид не оказывает отрицательного влияния на эмбриональное развитие плода. По значениям пред- и постимплатационной и общей эмбриональной смертности опытных животных, в сравнении с контрольными значениями, можно сказать, что препарат не индуцировал гибель эмбрионов в различные периоды эмбриогенеза. Масса и размеры плодов также не отличались от контроля, что говорит об отсутствии эмбриотоксического эффекта. При тщательном визуальном осмотре плодов во всех опытных группах не было обнаружено каких-либо внешних аномалий развития, в сравнении с контролем. По результатам выполнения девяти сагиттальных разрезов внутренних уродств, аномалий развития внутренних органов, нарушения топографии не было обнаружено. Тератогенный эффект, характеризующийся различными аномалиями со стороны внутренних органов плодов (метод Вильсона) и внешними дефектами развития, также не был отмечен. При изучении костной системы: размеры зачатков лопаточной; плечевой; локтевой; лучевой; бедренной; большой и малой берцовых костей у опытных и контрольных эмбрионов были близки по показателям (длина, мм). Состояние костной системы было без изменений (P>0,05). Следовательно, триклафасцид не проявил тератогенной активности при воздействии в “критические” периоды эмбриогенеза крыс.

Триклафасцид (ТКБ/АГ/Т), крысы, эмбриотоксический эффект, тератогенный эффект, пред- и постимплантационная гибель, общая эмбриональная смертность, эмбрионы, резорбция плодов, плацента, жёлтые тела, Triclafascid, rats, fetotoxic effects, teratogenic effects, pre - and postimplantation death, total embryo mortality, embryos, resorption of fetuses, placenta, yellow body

1. Boray J.C., Crowfoot P.D., Strong M.B. et al. // Vet. Rec. - 1983. - Vol. 113. - P 315-317.

2. Гаджиев И.М. Влияние антигельминтиков ивермектина, албендазола и фенотиазина на эмбриогенез и генетические структуры животных//Дисс.. канд. вет. наук. - М.,1985. - С. 56-123.

3. Демидов Н.В. Фасциолез животных //М., - Колос. - 1965.

4. Delatour P, Lorgue G., Lapras M. Deschanel J.P Proprietes emdryotoxigues (rat) et residus (ovins, bovins) de trois anthelmintigues derives du benzimidazole|| Bull. Soc.Sci., Vet. Med. Comp. Lion. - 1974. - v. 74. - n 2. - P 174-144-154.

5. Delatour P, Parish R., Cyurik R. Aibendazole* a comparison of relay emdryotoxicity of individual metabolites.||Ann. Rech. Vet. - 1981. - V. 12. - № 2. - P 159-167.

6. Delatour P,Yoshimura Y.H., Carmer F.Benoit E. Embryotoxicity compare des metabolites de 1'oxfenbazole.||Rec.Med.Vet. - 1982. -v. 158. - № 2. - P 369-373.

7. Мальцев К.Л. Экстенсивность и интенсивность фасциолёзной инвазии крупного рогатого скота в Центрально-черноземной зоне России / К.Л. Мальцев, А.Н. Аксенов. - М., 2001. - 6 с.

8. Методические рекомендации по доклиническому изучению репродуктивной токсичности фармакологических средств.

9. Сазанов А.М., Сафиуллин РГ Лечебная и экономическая эффективность политрема и гексихола при фасциолезе коров //Тез. докл.научн.конф. «Меры профилактики и борьбы с трематодозами человека и животных». - Сумы. - 1991. - С.104.

10. Скира В.Н., Демидов Н.В., Новик Т.С., Михайлюк А.Н. Предотвращение эмбриотоксического и тератогенного действия антигельминтиков-производных бензимидазолкарбаматов (на примере БМК) //Бюл. Всес. ин-та гельминтол. - 1984. - Вып. 39. - С. 77-78.

11. Сорокина, Н.П. Эпизоотология фасциолеза крупного рогатого скота в Московской области /Н.П. Сорокина, И.А. Молчанов // Основные достижения и перспективы развития паразитологии: Материалы международной конференции. - М., 2004. - С. 295-296.

12. Рябова В.А., Лаптева Л.А. Эмбриотоксическое и тератогенное действие БМК на зародыши крыс//Бюл.Всес. ин-та гельминтол. - 1981. - вып. 28. - С. 56-60.

13. Хабриев РУ. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ, - М., 2000.

14. Dawson A.B. //A not the staining of the Sceletion of cleared Specimens with alizarin red s.-Staintechn. - 1926. -1. - P. 123-124.

15. Dawson A.B., // A not the staining of the Sceletion of cleared Specimens with alizarin red s. - Stain techn. - 1926/ -1. - P. 123-124/

16. Wilson J.G. //Methods for administering and detecting malformations in experimental animals. In Teratology; Principles and Tichigues: J.G. Wilson and J. Warkani. Tds. University of Chicago Press, Chicago. - 1965. - P 262-277.