ПОЛОВОЗРЕЛЫЕ ПАРАЗИТЫ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА – SETARIA LABIATO-PAPILLOSA – ИСТОЧНИК ПОЛУЧЕНИЯ ДИАГНОСТИЧЕСКОГО АНТИГЕНА ПРИ ДИРОФИЛЯРИОЗЕ (DIROFILARIA IMMITIS)

Цель работы – оценка диагностической эффективности фракционированного антигена из половозрелых паразитов крупного рогатого скота – Setarialabiato-papillosa при дирофиляриозе (Dirofilariaimmitis).

Материалы и методы – антиген из половозрелых гельминтов S. labiato-papillosa, референс сыворотки инвазированных и не инвазированных собак. Реакция иммунодифузии (РИД) в агаровом геле с использованием референс сывороток собак, инвазированных D. immitis, и антигенов-экстрактов из S. labiato-papillosa и D. immitis. Метод гель-хроматографии на колонке Pharmacia, заполненной Superose 12 PrepGrade, и иммуноферментная реакция (ИФР).

Результаты и обсуждение – методом РИД установили перекрестно-реагирующие антигенные компоненты у D. immitis и S. labiato-papillosa. Методом фракционирования антигена из S. labiato-papillosa получено 40 белковых фракций, из которых 7 (17,5%) представляли интерес в диагностике дирофиляриоза. Диагностическая оценка этих фракций при дирофиляриозе проведена ИФР с 47 пробами сывороток собак, в том числе 11 проб с инвазией D. immitis; 6 – D. repens; 3 – Babesiacanis; 3 – Toxocaracanis; 9 – с непаразитарной патологией и 15 клинически здоровых. Результаты этого анализа показали, что из 11 проб сывороток крови собак, инвазированных D. immitis, в одной регистрировали ложноотрицательный ответ, а из 6 – с D. repens – в двух. Чувствительность теста составила 82,4%, специфичность – 83,3%. Аналогичный анализ этих сывороток, проведенный с очищенным антигеном-экстрактом из половозрелых D. immitis, показал чувствительность также 82,4%, а специфичность – 86,7%. Сопоставимость полученных результатов в диагностике дирофиляриоза ИФР с антигенными препаратами из сетарий и дирофилярий позволяет сделать заключение о возможности использования S. labiato-papillosa в качестве источника диагностического антигена при дирофиляриозе (D. immitis).

1. Астафьев Б.А., Петров О.Е. Эволюционно-генетическая теория паразитизма // Успехи современной биологии – 1992. – т. 112, №2. – С. 163-175.

2. Бережко В.К., Хайдаров В.К., Дахно Н.С., Шкурка Е.П. Иммунохимический анализ соматического экстракта из половозрелых Dirofilaria immitis. // Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями: материалы докладов научной конференции ВИГИС – 2008. – вып. 9. – С. 69-73.

3. Бережко В.К., Написанова Л.А., Медведев А.Ю., Хайдаров К.А., Шинкаренко А.Н., Колесников П.В. Физико-химическая и иммунодиагностическая характеристика цельного и фракционированного соматического экстракта Dirofilaria immitis. // Доклады Россельхозакадемии. – 2014. – №1. – С.71-74.

4. Бескровная Ю.Г., Нагорный С.А. Идентификация микрофилярий Dirofilaria spp. с помощью ПЦР. // Матер. докл. неуч. конф. «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями» –М.– 2008. – С. 73 -75.

5. Бескровная Ю.Г., Нагорный С.А., Васерин Ю.И. Оценка эффективности диагностики дирофиляриоза у собак с использованием соматического антигена Dirofilaria repens. // Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями: материалы докладов научной конференции ВИГИС – 2009. – вып. 10. – С. 61-63.

6. Криворотова Е.Ю. Биологические аспекты дирофиляриоза в ряде субъектов Российской Федерации. // Дис. … кандидата биологических наук. – 03.02.11. – Москва. – 2015. – 141С.

7. Медведев А.Ю. Распространение дирофиляриоз собак в Краснодарском крае и разработка его диагностики иммуноферментной реакцией. // Дис. … кандидата биологических наук. – 03.02.11. – Москва –2007 – С.137.

8. Сергиев В.П., Супряга В.Г., Дарченкова Н.Н., Жукова Л.А., Иванова Т.Н. Дирофиляриоз человека в России. // Российский паразитологический журнал. – 2012. – № 4. – С. 60-64.

9. Сергиев В.П., Супряга В.Г., Бронштейн А.М., Ганушкина Л.А., Ракова В.М., Морозов Е.Н., Федянина Л.В., Фролова А.А., Морозова Л.Ф., Иванова И.Б., Дарченкова Н.Н., Жукова Л.А. Итоги изучения дирофиляриоза человека в России. // Медицинская паразитология и паразитарные болезни – 2014. – № 3. – С. 3-9.

10. Фисько М.А., Фирсов Н.Ф. Дирофиляриоз. / / – Ростов н/Д, 2006. – 110 С.

11. Хайдаров К.А., Бережко В.К. Антигенный спектр соматических экстрактов из половозрелых сетарий и дирофилярий. // Российский паразитологический журнал. – 2009 – №1. – С. 68–74.

12. Akao N. Human dirofilariasis in Japan. // Trop Med Health. – 2011. – Vol. 39, N 1. Suppl 2. – P. 65-71.

13. Atwell R.B., Sheridan A.B., Baldock F.C. An evaluation of the Dirochek test for detection of Dirofilaria immitis antigen in dogs. // Aust. Vet. J. – 1988. – Vol. 65, N 5. – P. 161-162.

14. Capron A., Brygoo E.R., Afchain D. Apport de letude de la structure antigenique a la phylogenie des Helminthes. // Bull. Mus. Nat. hist. natur. Zoo.– 1972 – Vol. 55–p. 877-885.

15. Collins G.H., Pope S.E. An evaluation of an ELISA test for the detection of antigens of Dirofilaria immitis. // Aust. Vet. J. – 1987. – Vol. 64, N 10. – P. 318-319.

16. Gioia G., Lecová L., Genchi M. et al. Highly sensitive multiplex PCR for simultaneous detection and discrimination of Dirofilaria immitis and Dirofilaria repens in canine peripheral blood. / / Vet. Parasitol. – 2010. – Vol. 172, N 1-2. – P. 160-163.

17. Latrofa M.S., Dantas-Torres F., Annoscia G. et al. A duplex real-time polymerase chain reaction assay for the detection of and differentiation between Dirofilaria immitis and Dirofilaria repens in dogs and mosquitoes. // Vet. Parasitol. – 2012. – Vol. 185, N 2-4. – P. 181-185.

18. Lee A.C., Bowman D.D., Lucio-Forster A. et al. Evaluation of a new in-clinic method for the detection of canine heartworm antigen. // Vet. Parasitol. – 2011. – Vol. 177, N 3-4. – P. 387-391.

19. Mc Call J.W., Genchi C., Kramer L.H. et al. Heartworm disease in animals and humans. // Adv. Parasitol. – 2008. – Vol. 66. – P. 193-285.

20. Morchón R., Carretón E., González-Miguel J., Mellado-Hernández I. Heartworm Disease (Dirofilaria immitis) and Their Vectors in Europe New Distribution Trends. // Front. Physiol. – 2012. – Vol. 3. – Article 196.

21. Renaud F. Biodiversite, genetiqueet evolution dans les systemes hotes-parasites. // Bull. Soc. Zool. Ff. – 1992. – V. 117. – N 1–P. 109-115.

22. Rivasi F., Boldorini R., Criante P. et al. Detection of Dirofilaria (Nochtiella) repens DNA by polymerase chain reaction in embedded paraffin tissues from two human pulmonary locations. // APMIS. – 2006. – Vol. 114, N 7-8. – P. 567-574.

23. Sun M., Zhuo W., Guo S. et al. Serological survey of canine dirofilariosis in Chongqing, Kunming, Nanchang, Fuzhou, Guangzhou, Shenzhen, and Nanning in Southern China. // Vet. Parasitol. – 2012. – Vol. 185, N 2-4. – P. 225-228.

24. Weil G.J., Malane M.S, Powers K.G. Detection of circulating parasite antigens in canine dirofilariasis by counterimmunoelectrophoresis. // Am. J. Trop. Med. Hyg. – 1984. – Vol. 33, N 3. – P. 425-430.