Цель исследования: эмбриотоксическое и тератогенное действие нового отечественного супрамолекулярного комплекса триклабендазола «триклафасцид». Материалы и методы. Эмбриотоксическое и тератогенное действие новой отечественной лекарственной формы триклафасцида изучали соответствии с «Руководством по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ». Изучение эмбриотропного действия супрамолекулярного комплексного препарата на основе субстанции триклабендазола проводили на 40 белых беспородных крысах - самках массой 220-260г и 10 самцах, в соответствии с Методическими рекомендациями по оценке влияния препарата на генеративную функцию животных. К крысам-самкам подсаживали на ночь самцов из соотношения 1:4. Обнаружение спермиев во влагалищном мазке самки, на утро, после подсадки самца указывало на оплодотворение -первый день беременности. Так как чувствительность эмбриона к химическому веществу различна и зависит от стадий развития плода, животных разделили на 4 группы, по 10 особей в каждой. Триклафасцид вводили беременным самкам перорально в трехкратно увеличенной терапевтической дозе 6,0 мг/кг (60 мг/кг по препарату), первой группе с 1 по 6 день беременности, второй с 7 - 14, третьей с 15 - 19, четвертая группа служила контролем и получала 1% крахмальный гель. На 20-й день беременности крыс усыпляли углекислым газом. После убоя и вскрытия брюшной полости извлекали матку с плодами. Подсчитывали количество желтых тел беременности, мест имплантации, резорбции, живых и мертвых эмбрионов. Для оценки эмбриотоксического эффекта плоды просматривали под бинокулярной лупой для обнаружения внешних аномалий развития, взвешивали, измеряли кранио-каудальный размер, массу и диаметр плаценты. Определяли пред- и постимплантационную гибель и общую эмбриональную смертность эмбрионов. После осмотра эмбрионы от каждой крысы делили на две равные группы: первую фиксировали в растворе Буэна на 14 суток для изучения внутренних органов плодов и аномалий в развитии плодов, которые являются показателями тератогенного эффекта определяемые по методу J.G. Wilson (1965) в модификации отдела эмбриологии НИИЭМ АМН СССР (схема разрезов, сделанных через плод); вторую-фиксировали в 96° спирте для изучения костной системы после ее окрашивания по методу Даусона (A.B. Dawson, 1926). Полученные параметры обрабатывали методом вариационной статистики с помощью простого сравнения средних по двустороннему t-критерию Стьюдента. Различие определяли при 0,05 уровне значимости. Расчет выполнен с помощью программы «Student-200». Результаты и обсуждение. Как показали результаты исследований, триклафасцид не проявил эмбриотоксической активности при воздействии в 3-кратно увеличенной терапевтической дозе 6,0 мг/кг по ДВ. Так, уровень общей, пред-и постимплантационной смертности плодов в подопытных и контрольной группах достоверно не отличались, как при введении препарата на 1-6 дни беременности, так и на 7 - 14 и 15 - 19 дни. На основании полученных данных можно сделать вывод о том, что препарат Триклафасцид не оказывает отрицательного влияния на эмбриональное развитие плода. По значениям пред- и постимплатационной и общей эмбриональной смертности опытных животных, в сравнении с контрольными значениями, можно сказать, что препарат не индуцировал гибель эмбрионов в различные периоды эмбриогенеза. Масса и размеры плодов также не отличались от контроля, что говорит об отсутствии эмбриотоксического эффекта. При тщательном визуальном осмотре плодов во всех опытных группах не было обнаружено каких-либо внешних аномалий развития, в сравнении с контролем. По результатам выполнения девяти сагиттальных разрезов внутренних уродств, аномалий развития внутренних органов, нарушения топографии не было обнаружено. Тератогенный эффект, характеризующийся различными аномалиями со стороны внутренних органов плодов (метод Вильсона) и внешними дефектами развития, также не был отмечен. При изучении костной системы: размеры зачатков лопаточной; плечевой; локтевой; лучевой; бедренной; большой и малой берцовых костей у опытных и контрольных эмбрионов были близки по показателям (длина, мм). Состояние костной системы было без изменений (P>0,05). Следовательно, триклафасцид не проявил тератогенной активности при воздействии в “критические” периоды эмбриогенеза крыс.
The purpose of the study: embryotoxic and teratogenic effects of a new domestic supramolecular complex of triclabendazole “Triclafascid”. Materials and methods. Embryotoxic and teratogenic effects of new domestic formulations studied Triclafascid accordance with the “Manual on experimental (preclinical) study of new pharmacological substances”. The study embryotrophic actions supramolecular complex preparation on the basis of the substance of triclabendazole was performed on 40 white mongrel female rats weighing 220-260g and 10 males, in accordance with the guidelines on the assessment of the impact of drugs on generative function of animals. To rats-females were placed overnight male ratio of 1:4. Detection of sperm in the vaginal smear, the females, on the morning after the infusion of the male is pointed at fertilization -the first day of pregnancy. Since the sensitivity of the embryo to chemical and depends on the various stages of fetal development, the animals were divided into 4 groups of 10 animals each. Triclafascid was administered orally to pregnant females three times increased therapeutic dose of 6.0 mg/kg (60 mg/kg of the drug), the first group 1 on day 6 of pregnancy, the second from 7 - 14, third 15 and 19, the fourth group served as control and received 1% starch gel. On the 20th pregnancy day, the rats were euthanized with carbon dioxide. After slaughter and opening of the abdominal cavity have been removed the uterus with the fruit. Counted the number of yellow bodies of pregnancy, places of implantation, resorption, live and dead embryos. To assess the embryotoxic effect of the fruits were viewed under binocular magnifying glass to detect external anomalies, weighed, measured the cranio-caudal size, weight and diameter of placenta. Was determined pre - and postimplantation loss and total embryonic mortality of embryos. After inspection, the embryos from each rat was divided into two equal groups: the first were fixed in solution of Bouin for 14 days to study the internal organs of fetuses, and anomalies in developing fetuses, which are indications of teratogenic effect is determined by the method of J. G. Wilson (1965) in modification of the Department of embryology held the Academy of medical Sciences of the USSR (the scheme of transects made through the fetus); the second was fixed in 96 alcohol for study of the bone system after its dyeing by the method of Dawson (A. B. Dawson, 1926). The parameters obtained were processed by variation statistics with the help of simple comparisons of average according to the bilateral student’s t-test. The difference was determined at 0.05 level of significance. The calculations were performed using the “Student-200”. The results and discussion. As shown by the results of studies Triclafascid showed no embryotoxic activity when exposed to 3-fold increased therapeutic dose of 6.0 mg/kg po DV. So, overall, pre-and postimplantation mortality of fetuses in the experimental and control groups did not differ significantly, as with the introduction of the drug for 1-6 days of pregnancy and 7 -14 and 15 - 19 days. Based on these data it can be concluded that the drug Triclafascid has no negative influence on embryonic development. Values pre - and postimplantation and total embryonic mortality of experimental animals in comparison with control values, we can say that the drug did not induce the death of embryos in different periods of embryogenesis. The mass and size of the fruit also did not differ from the control, which indicates the absence of embryotoxic effect. A careful visual inspection of fruits in all experimental groups was not detected for any external malformations compared with controls. By the execution of nine sagittal sections of internal abnormalities, malformations of the internal organs, disorders of the topography was found. A teratogenic effect characterized by different anomalies of the internal organs of fetuses (Wilson’s method) and external defects were also not observed. When studying the skeletal system: the sizes of the rudiments of the shoulder; brachial; ulnar; radial; femoral; large and small tibial bones from experimental and control embryos were similar in metrics (length, mm). The condition of the bone system was unchanged (P>0,05). Therefore, Triclafascid showed no teratogenic activity when exposed at critical periods of embryogenesis of rats.
The authors declare that there are no conflicts of interest present.