vniigisРоссийский паразитологический журналRussian Journal of Parasitology1998-84352541-7843ВНИИП – филиал ФГБНУ ФНЦ ВИЭВ РАН10.12737/20062vniigis-338Research ArticleБИОХИМИЯ, БИОТЕХНОЛОГИЯ И ДИАГНОСТИКАBIOCHEMISTRY, BIOTECHNOLOGY AND DIAGNOSTICSПОЛОВОЗРЕЛЫЕ ПАРАЗИТЫ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА – SETARIA LABIATO-PAPILLOSA – ИСТОЧНИК ПОЛУЧЕНИЯ ДИАГНОСТИЧЕСКОГО АНТИГЕНА ПРИ ДИРОФИЛЯРИОЗЕ (DIROFILARIA IMMITIS)MATURE SETARIA LABIATO-PAPILLOSA IN CATTLE – A SOURCE FOR RECEIVING ANTIGENS FOR DIAGNOSIS OF DIROFILARIASIS (DIROFILARIA IMMITIS)БережкоВ. К.BerezhkoV. K.

117218, Россия, Москва, ул. Б. Черемушкинская, 28, e-mail: berejko@vniigis.ru, napisanova@vniigis.ru, amina7161@yandex.ru

117218 Russia, 28 B. Cheremushkinskaya St., e-mail: berejko@vniigis.ru, napisanova@vniigis.ru

berejko@vniigis.ruХайдаровК. А.KhaydarovV. K.

117218, Россия, Москва, ул. Б. Черемушкинская, 28, e-mail: berejko@vniigis.ru, napisanova@vniigis.ru, amina7161@yandex.ru

117218 Russia, 28 B. Cheremushkinskaya St., e-mail: berejko@vniigis.ru, napisanova@vniigis.ru

berejko@vniigis.ruНаписановаЛ. А.NapisanovaL. A.

117218, Россия, Москва, ул. Б. Черемушкинская, 28, e-mail: berejko@vniigis.ru, napisanova@vniigis.ru, amina7161@yandex.ru

117218 Russia, 28 B. Cheremushkinskaya St., e-mail: berejko@vniigis.ru, napisanova@vniigis.ru

berejko@vniigis.ruТхакаховаА. А.ThakahovaA. A.

117218, Россия, Москва, ул. Б. Черемушкинская, 28, e-mail: berejko@vniigis.ru, napisanova@vniigis.ru, amina7161@yandex.ru

117218 Russia, 28 B. Cheremushkinskaya St., e-mail: berejko@vniigis.ru, napisanova@vniigis.ru

berejko@vniigis.ruВсероссийский научно-исследовательский институт фундаментальной и прикладной паразитологии животных и растений имени К. И. СкрябинаРоссияAll-Russian Scientific Research Institute of Fundamental and Applied Parasitology of Animals and Plants named after K.I. SkryabinRussian Federation201620122016362192201Copyright © Бережко В.К., Хайдаров К.А., Написанова Л.А., Тхакахова А.А., 20162016Бережко В.К., Хайдаров К.А., Написанова Л.А., Тхакахова А.А.Berezhko V.K., Khaydarov V.K., Napisanova L.A., Thakahova A.A.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://vniigis.elpub.ru/jour/article/view/338

Цель работы – оценка диагностической эффективности фракционированного антигена из половозрелых паразитов крупного рогатого скота – Setarialabiato-papillosa при дирофиляриозе (Dirofilariaimmitis).

Материалы и методы – антиген из половозрелых гельминтов S. labiato-papillosa, референс сыворотки инвазированных и не инвазированных собак. Реакция иммунодифузии (РИД) в агаровом геле с использованием референс сывороток собак, инвазированных D. immitis, и антигенов-экстрактов из S. labiato-papillosa и D. immitis. Метод гель-хроматографии на колонке Pharmacia, заполненной Superose 12 PrepGrade, и иммуноферментная реакция (ИФР).

Результаты и обсуждение – методом РИД установили перекрестно-реагирующие антигенные компоненты у D. immitis и S. labiato-papillosa. Методом фракционирования антигена из S. labiato-papillosa получено 40 белковых фракций, из которых 7 (17,5%) представляли интерес в диагностике дирофиляриоза. Диагностическая оценка этих фракций при дирофиляриозе проведена ИФР с 47 пробами сывороток собак, в том числе 11 проб с инвазией D. immitis; 6 – D. repens; 3 – Babesiacanis; 3 – Toxocaracanis; 9 – с непаразитарной патологией и 15 клинически здоровых. Результаты этого анализа показали, что из 11 проб сывороток крови собак, инвазированных D. immitis, в одной регистрировали ложноотрицательный ответ, а из 6 – с D. repens – в двух. Чувствительность теста составила 82,4%, специфичность – 83,3%. Аналогичный анализ этих сывороток, проведенный с очищенным антигеном-экстрактом из половозрелых D. immitis, показал чувствительность также 82,4%, а специфичность – 86,7%. Сопоставимость полученных результатов в диагностике дирофиляриоза ИФР с антигенными препаратами из сетарий и дирофилярий позволяет сделать заключение о возможности использования S. labiato-papillosa в качестве источника диагностического антигена при дирофиляриозе (D. immitis).

Objective of research

Objective of research:   to estimate the efficacy of fractionated antigen of mature cattle parasites Setaria labiato-papillosa in diagnosis of dirofilariasis (Dirofilaria immitis).

Materials and methods

Materials and methods:  Antigens of mature Setaria labiato-papillosa, reference sera from infected and not infected dogs. Reaction of immunodiffusion (RID) in agar gel using reference sera from dogs infected with D. immitis, and extracts from S. labiato-papillosa and D. immitis. Gel-chromatographic method on Pharmacia columns of Superose 12 Prep Grade and immunoenzymatic reaction (IER).

Results and discussion

Results and discussion: The reaction of immunodiffusion (RID) was used to detect cross-reacting antigens of D. immitis and  S. labiato-papillosa.  The fractionation of antigen-extract from S. labiato-papillosa allows to get 40 protein fractions, 7 (17,5%) of which were of interest for diagnosis of dirofilariasis. The evaluation of these fractions with respect to diagnosis of dirofilariasis was performed  by immunoenzymatic reaction with 47 serum samples from dogs including 11 serum samples from D. immitis infected dogs; 6  D. repens; 3 – Babesia canis; 3 – Toxocara canis; 9samples from dogs with non-parasitic pathology and 15 – from clinically healthy dogs. These results revealed that in one of 11 serum samples infected by D. immitis, and in two of 6 serum samples infected by D. repens a false-negative response has been registered.

The test sensitivity was 82,4%, the specificity – 83,3%. The sensitivity of the similar test with these sera using the purified antigen extract from mature D. immitis, was also 82,4%, and the specificity – 86,7%.

The comparability of diagnostic test results for dirofilariasis by IER using antigenic preparations from Setaria and Dirofilaria allows to come to a conclusion that it is possible to use S. labiato-papillosa as a source of antigen for diagnosis of dirofilariasis (D. immitis).

Setaria labiato-papillosaDirofilaria immitisкрупный рогатый скотсыворотки собакфракционированный антигениммуноферментная реакцияSetaria labiato-papillosaDirofilaria immitiscattledog serafractionated antigenimmunoenzymatic reactionReferencesАстафьев Б.А., Петров О.Е. Эволюционно-генетическая теория паразитизма // Успехи современной биологии – 1992. – т. 112, №2. – С. 163-175.Астафьев Б.А., Петров О.Е. Эволюционно-генетическая теория паразитизма // Успехи современной биологии – 1992. – т. 112, №2. – С. 163-175.Бережко В.К., Хайдаров В.К., Дахно Н.С., Шкурка Е.П. Иммунохимический анализ соматического экстракта из половозрелых Dirofilaria immitis. // Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями: материалы докладов научной конференции ВИГИС – 2008. – вып. 9. – С. 69-73.Бережко В.К., Хайдаров В.К., Дахно Н.С., Шкурка Е.П. Иммунохимический анализ соматического экстракта из половозрелых Dirofilaria immitis. // Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями: материалы докладов научной конференции ВИГИС – 2008. – вып. 9. – С. 69-73.Бережко В.К., Написанова Л.А., Медведев А.Ю., Хайдаров К.А., Шинкаренко А.Н., Колесников П.В. Физико-химическая и иммунодиагностическая характеристика цельного и фракционированного соматического экстракта Dirofilaria immitis. // Доклады Россельхозакадемии. – 2014. – №1. – С.71-74.Бережко В.К., Написанова Л.А., Медведев А.Ю., Хайдаров К.А., Шинкаренко А.Н., Колесников П.В. Физико-химическая и иммунодиагностическая характеристика цельного и фракционированного соматического экстракта Dirofilaria immitis. // Доклады Россельхозакадемии. – 2014. – №1. – С.71-74.Бескровная Ю.Г., Нагорный С.А. Идентификация микрофилярий Dirofilaria spp. с помощью ПЦР. // Матер. докл. неуч. конф. «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями» –М.– 2008. – С. 73 -75.Бескровная Ю.Г., Нагорный С.А. Идентификация микрофилярий Dirofilaria spp. с помощью ПЦР. // Матер. докл. неуч. конф. «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями» –М.– 2008. – С. 73 -75.Бескровная Ю.Г., Нагорный С.А., Васерин Ю.И. Оценка эффективности диагностики дирофиляриоза у собак с использованием соматического антигена Dirofilaria repens. // Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями: материалы докладов научной конференции ВИГИС – 2009. – вып. 10. – С. 61-63.Бескровная Ю.Г., Нагорный С.А., Васерин Ю.И. Оценка эффективности диагностики дирофиляриоза у собак с использованием соматического антигена Dirofilaria repens. // Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями: материалы докладов научной конференции ВИГИС – 2009. – вып. 10. – С. 61-63.Криворотова Е.Ю. Биологические аспекты дирофиляриоза в ряде субъектов Российской Федерации. // Дис. … кандидата биологических наук. – 03.02.11. – Москва. – 2015. – 141С.Криворотова Е.Ю. Биологические аспекты дирофиляриоза в ряде субъектов Российской Федерации. // Дис. … кандидата биологических наук. – 03.02.11. – Москва. – 2015. – 141С.Медведев А.Ю. Распространение дирофиляриоз собак в Краснодарском крае и разработка его диагностики иммуноферментной реакцией. // Дис. … кандидата биологических наук. – 03.02.11. – Москва –2007 – С.137.Медведев А.Ю. Распространение дирофиляриоз собак в Краснодарском крае и разработка его диагностики иммуноферментной реакцией. // Дис. … кандидата биологических наук. – 03.02.11. – Москва –2007 – С.137.Сергиев В.П., Супряга В.Г., Дарченкова Н.Н., Жукова Л.А., Иванова Т.Н. Дирофиляриоз человека в России. // Российский паразитологический журнал. – 2012. – № 4. – С. 60-64.Сергиев В.П., Супряга В.Г., Дарченкова Н.Н., Жукова Л.А., Иванова Т.Н. Дирофиляриоз человека в России. // Российский паразитологический журнал. – 2012. – № 4. – С. 60-64.Сергиев В.П., Супряга В.Г., Бронштейн А.М., Ганушкина Л.А., Ракова В.М., Морозов Е.Н., Федянина Л.В., Фролова А.А., Морозова Л.Ф., Иванова И.Б., Дарченкова Н.Н., Жукова Л.А. Итоги изучения дирофиляриоза человека в России. // Медицинская паразитология и паразитарные болезни – 2014. – № 3. – С. 3-9.Сергиев В.П., Супряга В.Г., Бронштейн А.М., Ганушкина Л.А., Ракова В.М., Морозов Е.Н., Федянина Л.В., Фролова А.А., Морозова Л.Ф., Иванова И.Б., Дарченкова Н.Н., Жукова Л.А. Итоги изучения дирофиляриоза человека в России. // Медицинская паразитология и паразитарные болезни – 2014. – № 3. – С. 3-9.Фисько М.А., Фирсов Н.Ф. Дирофиляриоз. / / – Ростов н/Д, 2006. – 110 С.Фисько М.А., Фирсов Н.Ф. Дирофиляриоз. / / – Ростов н/Д, 2006. – 110 С.Хайдаров К.А., Бережко В.К. Антигенный спектр соматических экстрактов из половозрелых сетарий и дирофилярий. // Российский паразитологический журнал. – 2009 – №1. – С. 68–74.Хайдаров К.А., Бережко В.К. Антигенный спектр соматических экстрактов из половозрелых сетарий и дирофилярий. // Российский паразитологический журнал. – 2009 – №1. – С. 68–74.Akao N. Human dirofilariasis in Japan. // Trop Med Health. – 2011. – Vol. 39, N 1. Suppl 2. – P. 65-71.Akao N. Human dirofilariasis in Japan. // Trop Med Health. – 2011. – Vol. 39, N 1. Suppl 2. – P. 65-71.Atwell R.B., Sheridan A.B., Baldock F.C. An evaluation of the Dirochek test for detection of Dirofilaria immitis antigen in dogs. // Aust. Vet. J. – 1988. – Vol. 65, N 5. – P. 161-162.Atwell R.B., Sheridan A.B., Baldock F.C. An evaluation of the Dirochek test for detection of Dirofilaria immitis antigen in dogs. // Aust. Vet. J. – 1988. – Vol. 65, N 5. – P. 161-162.Capron A., Brygoo E.R., Afchain D. Apport de letude de la structure antigenique a la phylogenie des Helminthes. // Bull. Mus. Nat. hist. natur. Zoo.– 1972 – Vol. 55–p. 877-885.Capron A., Brygoo E.R., Afchain D. Apport de letude de la structure antigenique a la phylogenie des Helminthes. // Bull. Mus. Nat. hist. natur. Zoo.– 1972 – Vol. 55–p. 877-885.Collins G.H., Pope S.E. An evaluation of an ELISA test for the detection of antigens of Dirofilaria immitis. // Aust. Vet. J. – 1987. – Vol. 64, N 10. – P. 318-319.Collins G.H., Pope S.E. An evaluation of an ELISA test for the detection of antigens of Dirofilaria immitis. // Aust. Vet. J. – 1987. – Vol. 64, N 10. – P. 318-319.Gioia G., Lecová L., Genchi M. et al. Highly sensitive multiplex PCR for simultaneous detection and discrimination of Dirofilaria immitis and Dirofilaria repens in canine peripheral blood. / / Vet. Parasitol. – 2010. – Vol. 172, N 1-2. – P. 160-163.Gioia G., Lecová L., Genchi M. et al. Highly sensitive multiplex PCR for simultaneous detection and discrimination of Dirofilaria immitis and Dirofilaria repens in canine peripheral blood. / / Vet. Parasitol. – 2010. – Vol. 172, N 1-2. – P. 160-163.Latrofa M.S., Dantas-Torres F., Annoscia G. et al. A duplex real-time polymerase chain reaction assay for the detection of and differentiation between Dirofilaria immitis and Dirofilaria repens in dogs and mosquitoes. // Vet. Parasitol. – 2012. – Vol. 185, N 2-4. – P. 181-185.Latrofa M.S., Dantas-Torres F., Annoscia G. et al. A duplex real-time polymerase chain reaction assay for the detection of and differentiation between Dirofilaria immitis and Dirofilaria repens in dogs and mosquitoes. // Vet. Parasitol. – 2012. – Vol. 185, N 2-4. – P. 181-185.Lee A.C., Bowman D.D., Lucio-Forster A. et al. Evaluation of a new in-clinic method for the detection of canine heartworm antigen. // Vet. Parasitol. – 2011. – Vol. 177, N 3-4. – P. 387-391.Lee A.C., Bowman D.D., Lucio-Forster A. et al. Evaluation of a new in-clinic method for the detection of canine heartworm antigen. // Vet. Parasitol. – 2011. – Vol. 177, N 3-4. – P. 387-391.Mc Call J.W., Genchi C., Kramer L.H. et al. Heartworm disease in animals and humans. // Adv. Parasitol. – 2008. – Vol. 66. – P. 193-285.Mc Call J.W., Genchi C., Kramer L.H. et al. Heartworm disease in animals and humans. // Adv. Parasitol. – 2008. – Vol. 66. – P. 193-285.Morchón R., Carretón E., González-Miguel J., Mellado-Hernández I. Heartworm Disease (Dirofilaria immitis) and Their Vectors in Europe New Distribution Trends. // Front. Physiol. – 2012. – Vol. 3. – Article 196.Morchón R., Carretón E., González-Miguel J., Mellado-Hernández I. Heartworm Disease (Dirofilaria immitis) and Their Vectors in Europe New Distribution Trends. // Front. Physiol. – 2012. – Vol. 3. – Article 196.Renaud F. Biodiversite, genetiqueet evolution dans les systemes hotes-parasites. // Bull. Soc. Zool. Ff. – 1992. – V. 117. – N 1–P. 109-115.Renaud F. Biodiversite, genetiqueet evolution dans les systemes hotes-parasites. // Bull. Soc. Zool. Ff. – 1992. – V. 117. – N 1–P. 109-115.Rivasi F., Boldorini R., Criante P. et al. Detection of Dirofilaria (Nochtiella) repens DNA by polymerase chain reaction in embedded paraffin tissues from two human pulmonary locations. // APMIS. – 2006. – Vol. 114, N 7-8. – P. 567-574.Rivasi F., Boldorini R., Criante P. et al. Detection of Dirofilaria (Nochtiella) repens DNA by polymerase chain reaction in embedded paraffin tissues from two human pulmonary locations. // APMIS. – 2006. – Vol. 114, N 7-8. – P. 567-574.Sun M., Zhuo W., Guo S. et al. Serological survey of canine dirofilariosis in Chongqing, Kunming, Nanchang, Fuzhou, Guangzhou, Shenzhen, and Nanning in Southern China. // Vet. Parasitol. – 2012. – Vol. 185, N 2-4. – P. 225-228.Sun M., Zhuo W., Guo S. et al. Serological survey of canine dirofilariosis in Chongqing, Kunming, Nanchang, Fuzhou, Guangzhou, Shenzhen, and Nanning in Southern China. // Vet. Parasitol. – 2012. – Vol. 185, N 2-4. – P. 225-228.Weil G.J., Malane M.S, Powers K.G. Detection of circulating parasite antigens in canine dirofilariasis by counterimmunoelectrophoresis. // Am. J. Trop. Med. Hyg. – 1984. – Vol. 33, N 3. – P. 425-430.Weil G.J., Malane M.S, Powers K.G. Detection of circulating parasite antigens in canine dirofilariasis by counterimmunoelectrophoresis. // Am. J. Trop. Med. Hyg. – 1984. – Vol. 33, N 3. – P. 425-430.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.