vniigisРоссийский паразитологический журналRussian Journal of Parasitology1998-84352541-7843ВНИИП – филиал ФГБНУ ФНЦ ВИЭВ РАН10.12737/23082vniigis-316Research ArticleФАРМАКОЛОГИЯ, ТОКСИКОЛОГИЯPHARMACOLOGY, TOXICOLOGYОПРЕДЕЛЕНИЕ ФЕНБЕНДАЗОЛА И ЕГО МЕТАБОЛИТОВ В МОЛОКЕ КОРОВ МЕТОДОМ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ С МАСС-СПЕКТРОМЕТРИЧЕСКИМ ДЕТЕКТИРОВАНИЕМDETERMINATION OF FENBENDAZOLE AND ITS METABOLITES IN MILK BY THE METHOD OF LIQUID CHROMATOGRAPHY COUPLED WITH TANDEM MASS SPECTROMETRYКочетковП. П.KochetkovP. P.

117218, Москва, ул. Б. Черемушкинская, 28;

117218, Москва, ул. Б. Черемушкинская, 28, стр. 11 А

117218, Moscow, 28 B. Cheremushkinskaya St.;

117218, Russia, Moscow, 28 B. Cheremushkinskaya St.

varlamova@vniigis.ruВарламоваА. И.VarlamovaA. I.

117218, Москва, ул. Б. Черемушкинская, 28

117218, Moscow, 28 B. Cheremushkinskaya St.

varlamova@vniigis.ruАбрамовВ. Е.AbramovV. E.

117218, Москва, ул. Б. Черемушкинская, 28

117218, Moscow, 28 B. Cheremushkinskaya St.

varlamova@vniigis.ruМисюраН. С.MisuraN. S.

117218, Москва, ул. Б. Черемушкинская, 28, стр. 11 А

117218, Russia, Moscow, 28 B. Cheremushkinskaya St.

cozos@mail.ruАбрамоваЕ. В.AbramovaE. V.

117218, Москва, ул. Б. Черемушкинская, 28;

117218, Москва, ул. Б. Черемушкинская, 28, стр. 11 А

117218, Moscow, 28 B. Cheremushkinskaya St.;

117218, Russia, Moscow, 28 B. Cheremushkinskaya St.

varlamova@vniigis.ruАбрамовС. В.AbramovS. B.

117218, Москва, ул. Б. Черемушкинская, 28;

117218, Москва, ул. Б. Черемушкинская, 28, стр. 11 А

117218, Moscow, 28 B. Cheremushkinskaya St.;

117218, Russia, Moscow, 28 B. Cheremushkinskaya St.

varlamova@vniigis.ruКошеваровН. И.KoshevarovN. I.

117218, Москва, ул. Б. Черемушкинская, 28, стр. 11 А

117218, Russia, Moscow, 28 B. Cheremushkinskaya St.

АрхиповИ. А.ArkhipovI. A.

117218, Москва, ул. Б. Черемушкинская, 28

117218, Moscow, 28 B. Cheremushkinskaya St.

varlamova@vniigis.ruВсероссийский научно-исследовательский институт фундаментальной и прикладной паразитологии животных и растений им. К.И. Скрябина; «Международный научно-исследовательский центр охраны здоровья человека, животных и окружающей среды»РоссияAll-Russian Scientific Research Institute of Fundamental and Applied Parasitology of Animals and Plants named after K. I. Skryabin; International Research Center for protection of human health, animals and environment.Russian FederationВсероссийский научно-исследовательский институт фундаментальной и прикладной паразитологии животных и растений им. К.И. СкрябинаРоссияAll-Russian Scientific Research Institute of Fundamental and Applied Parasitology of Animals and Plants named after K. I. SkryabinRussian Federation«Международный научно-исследовательский центр охраны здоровья человека, животных и окружающей среды»РоссияInternational Research Center for protection of human health, animals and environmentRussian FederationВсероссийский научно-исследовательский институт фундаментальной и прикладной паразитологии животных и растений им. К.И. Скрябина; «Международный научно-исследовательский центр охраны здоровья человека, животных и окружающей среды»РоссияAll-Russian Scientific Research Institute of Fundamental and Applied Parasitology of Animals and Plants named after K. I. Skryabin; International Research Center for protection of human health, animals and environmentRussian Federation201616122016384554562Copyright © Кочетков П.П., Варламова А.И., Абрамов В.Е., Мисюра Н.С., Абрамова Е.В., Абрамов С.В., Кошеваров Н.И., Архипов И.А., 20162016Кочетков П.П., Варламова А.И., Абрамов В.Е., Мисюра Н.С., Абрамова Е.В., Абрамов С.В., Кошеваров Н.И., Архипов И.А.Kochetkov P.P., Varlamova A.I., Abramov V.E., Misura N.S., Abramova E.V., Abramov S.B., Koshevarov N.I., Arkhipov I.A.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://vniigis.elpub.ru/jour/article/view/316

Цель исследования — разработка методики определения фенбендазола и его метаболитов в молоке коров методом жидкостной хроматографии высокого давления с последующим масс-спектрометрическим детектированием.

Материалы и методы

Материалы и методы. Фенбендазол назначали 5 коровам в дозе 4,8 мг/кг перорально. Пробы молока отбирали через 1, 3, 5 и 10 суток после введения препарата. Методика работы включает описание реактивов, посуды и оборудования, масс-спектрометрические условия анализа фенбендазола и его производных, подготовку оборудования к работе, приготовление раствора элюента, подготовку хроматографа к анализу, определение хроматографических параметров стандартных образцов препарата, подготовку проб молока к анализу, определение параметров хроматографирования экстрактов, процедуру калибровки фенбендазола и метаболитов в элюенте.

Результаты и обсуждение

Результаты и обсуждение. При изучении фармакокинетики фенбендазола и его метаболитов (сульфона и сульфоксида) в молоке кров установлено, что максимальные концентрации обнаружены через 24 ч после введения препарата и составили 22,6 нг/мл для фенбендазол сульфона, 34,0 нг/мл для фенбендазол сульфоксида и 19,7 нг/мл для фенбендазола. Спустя 10 суток после введения препарата содержание фенбендазола и его метаболитов в молоке коров не превышало максимально допустимых значений.

Objective of research

Objective of research: Development of methods for the determination of fenbendazole and its metabolites in milk by liquid chromatography coupled with tandem mass spectrometry.

Materials and methods

Materials and methods: Fenbendazole was administered orally to five cows. Samples of milk were taken on 1, 3, 5 and 10 days of drug application. The research method includes a description of reagents, plates and equipment; mass-spectrometric conditions for analysis of fenbendazole and its metabolites; preparation of the equipment to operation; preparation of eluent solution; preparation of the chromatograph to analysis; determination of chromatographic parameters of standard drug samples; preparation of milk samples to analysis; establishment of parameters of extracts’ chromatography; procedure of calibration of fenbendazole and its metabolites in eluent.

Results and discussion

Results and discussion: When studying the pharmacokinetics of fenbendazole and its metabolites (sulfone and sulfoxide) in milk, it was found that the maximal concentrations were determined 24 h after drug administration and were 22,6 ng/ml for fenbendazole sulfone, 34,0 ng/ml for fenbendazole sulfoxide and 19,7 ng/ml for fenbendazole. 10 days after treatment, the concentrations of fenbendazole and its metabolites in milk did not exceed permitted values.

молокофенбендазолметаболитысульфоксидсульфонфармакокинетикажидкостная хроматографиямасс-спектрометрияmilkfenbendazolemetabolitesulfoxidesulfonepharmacokineticsliquid chromatographymass-spectrometryReferencesАрхипов И.А., Радионов А.В., Белова Е.Е., Садов К.М., Архипова А.И. Антигельминтная эффективность вигисокса при гельминтозах овец // Рос. паразитол. журнал. — 2010. — № 4. — С. 89–93.Arkhipov I.A., Radionov A.V., Belova E.E., Sadov K.M., Arhipova A.I. Anthelmintic efficacy of vigisox at helminthiasis in sheep. Ros. parazitol. zhurnal [Russian Journal of Parasitology], 2010, no. 4, pp. 89–93.Архипов И.А., Варламова А.В., Данилевская Н.В., Белова Е.Е., Садов К.И. Эффективность вигисокса при гельминтозах молодняка крупного рогатого скота // Рос. паразитол. журнал. — 2011. — № 4. — С. 126–129.Arkhipov I.A., Varlamova A.V., Danilevskaya N.V., Belova E.E., Sadov K.I. Efficacy of vigisox at helminthiasis in young cattle. Ros. parazitol. zhurnal [Russian Journal of Parasitology], 2011, no. 4, pp. 126–129.Архипов И.А., Варламова А.И., Данилевская Н. В. Методика по применению вигисокса при гельминтозах жвачных животных // Рос. паразитол. журнал. — 2013. — № 2. — С. 112–113.Arkhipov I.A., Varlamova A.I., Danilevskaya N. V. Methods for the use of vigisox at helminthiasis in ruminants. Ros. parazitol. Zhurnal [Russian Journal of Parasitology], 2013, no. 2, pp. 112–113.ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений.Carroll R.J., Ruppert D. Transformation and Weighting in Regression, Chapman and Hall, New York. 1988.Эпштейн Н.А. Оценка пригодности (валидация) ВЭЖХ методик в фармацевтическом анализе (обзор) // Химико-фармацевтический журнал. — 2004. — Т. 38, № 4. — С. 48–56.Chiap P., Boulanger B., Dewe W. et al. An Analysis of the SFSTP guide on Validation of Chromatographic bioanalytical Methods: Progress and Limitations. J. Pharm. Biomed. Anal., 2003, vol. 32, pp. 753–765.Carroll R.J., Ruppert D. Transformation and Weighting in Regression, Chapman and Hall, New York. — 1988.Committee for medicinal products for veterinary use. Fenbendazole (extrapolation to all ruminants). EMEA/MRL/866/03-FINAL/June 2004.Chiap P., Boulanger B., Dewe W. et al. An Analysis of the SFSTP guide on Validation of Chromatographic bioanalytical Methods: Progress and Limitations. J. Pharm. Biomed. Anal., 2003, Vol. 32, pp. 753–765.Epshtein N.A. Validation of HPLC techniques in pharmaceutical analysis (review). Khimikofarmatsevticheskiy zhurnal [Pharmaceutical Chemistry Journal], 2004, vol. 38, no. 4, pp. 48–56.Committee for medicinal products for veterinary use. Fenbendazole (extrapolation to all ruminants). EMEA/MRL/866/03-FINAL/June 2004.Ermer J., Miller J. H. McB. Method Validation in Pharmaceutical Analysis. 2006, John Wiley & Sons, p. 418.Ermer J., Miller J. H. McB. Method Validation in Pharmaceutical Analysis / John Wiley & Sons, 2006, P. 418.GOST R ISO 5725-6-2002 Accuracy (trueness and precision) of measurement methods and results. Место/год/издательство???Хамиде Др., Сеньюва З., Гилберт Дж. Простое руководство для пользователей по разработке и валидации методов / Пер. под ред. А. Галкин. — М: «ООО Ториус 77», 2011. — 43 с.Hartmann C., Smeyers–Verbeke J., Massart D. L., McDowall R. D. Validation on bioanalytical chromatographic methods. J. Pharm. Biomed. Anal., 1998, vol. 17, pp. 193–218.Hartmann C., Smeyers–Verbeke J., Massart D. L., McDowall R. D. Validation on bioanalytical chromatographic methods. J. Pharm. Biomed. Anal., 1998, Vol. 17, pp. 193–218.Marriner S.E., Bogan J.A. Pharmacokinetics of fenbendazole in sheep. Am. J. Vet. Res. — 1981, мol. 42, No 7, pp. 1146–1148.Marriner S.E., Bogan J.A. Pharmacokinetics of fenbendazole in sheep. Am. J. Vet. Res. — 1981, Vol. 42, No 7, pp. 1146–1148.Prichard E., Barwick V. Quality assurance in analytical chemistry. Spb., Publ. «Professiya», 2011. 320 p. (Russ. ed.: Kontrol’ kachestva v analiticheskoj himii)Причард Э., Барвик В. Контроль качества в аналитической химии / Пер. с англ. под. ред. И. В. Болдырёва. — СПб: «Профессия», 2011. — 320 с.Rew R.S., Fetterer R.H. Mode of action of Antinematodal Drugs. Chemotherapy of parasitic diseases, 1986, pp. 321–334.Rew R.S., Fetterer R.H. Mode of action of Antinematodal Drugs. In «Chemotherapy of parasitic diseases» Ed. W. C. Campbell, R. S. Rew, 1986, pp. 321–334.Senyuva H.Z., Gilbert J. A simple users’ guide to methods of development and validation. (Russ. ed.: Prostoe rukovodstvo dlya pol’zovateley po razrabotke i validatsii metodov). M., Torius 77 Ltd., 2011. 43 p.Van den Bossche H. Chemotherapy of parasitic infections. Nature (London), 1978, Vol. 273, P. 626–630.Van den Bossche H. Chemotherapy of parasitic infections. Nature (London), 1978, vol. 273, pp. 626–630.US Food and Drug Administration. Guidance for industry: Q2B validation of analytical procedures: methodology. Rockville, MD. 1996.US Food and Drug Administration. Guidance for industry: Q2B validation of analytical procedures: methodology. Rockville, MD. 1996.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.